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2021
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簡介：10x Genomics 是基于微流控技術的單細胞系統，可同時獲得100-800000個細胞的表達信息，實現對細胞群體的劃分與細胞群體間基因表達差異的檢測，是腫瘤細胞異質性、免疫細胞群體檢測以及胚胎發育研究的黃金方法。10xGenomics單細胞應用廣泛，可應用的細胞類型有：生殖細胞，胚胎細胞，神經細胞，免疫細胞，腫瘤細胞，干細胞，其他原代細胞。1 實驗流程1.1實驗流程圖1.2實驗描述1) 細胞質檢RNA，用Countess®II Automated Cell Counter對細胞計數，將細胞濃度調整到理想濃度1×106/mL。2) 10x 標記cDNA 片段，含有barcode信息的凝膠珠子首先與細胞和酶的混合物結合，然后被位于微流體'雙十字'連接中的油表面活性劑液滴包裹。液滴非常小，僅能容納一個凝膠珠子，液滴流到儲液器中被收集后，凝膠珠子溶解釋放引物序列，逆轉錄cDNA 片段，并以cDNA 為模板進行PCR 擴增。將每個液滴中含有barcode信息的產物混合，構建測序文庫。3) 建庫，首先利用Biorupter 超聲破碎儀將c...