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          基爾頓生物科技 JRDUN BIOTECHNOLOGY
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          ADD: 上海市長江南路180號長江軟件園B區B638室   TEL: 021-55130726 FOX:021-55130728 MAIL:ligaowei@jrdun.com
          Products 分子生物學實驗
          產品名稱: 熒光定量PCR
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          一、服務介紹實時PCR(real-time PCR),屬于定量PCR(Q-PCR)的一種,以時間內DNA的增幅量為基礎進行DNA的定量分析。定量方式包括定量和相對定量??蓹z測mRNA,microRNA,lncRNA和DNA水平的基因拷貝數變化。二、服務流程1、引物設計與合成2、DNA/RNA抽提3、反轉錄(針對RNA)4、上機定量分析三、客戶提供1、全血、組織或細胞。2、引物,或由豐核提供。3、基因信息:目的基因名稱、物種和序列(或GenBank Accession Number)。四、交付內容實驗報告:詳細操作步驟原始數據:溶解曲線圖,擴增曲線圖,ct值五、服務列表項目備注周期引物設計與合成3個工作日提取RNA提取、miRNA提取、DNA提取2個工作日反轉錄2個工作日qPCR反應SYBR Green方法,相對定量2個工作日
          產品名稱: 普通電泳PCR
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          普通電泳PCR:瓊脂糖凝膠電泳,通過凝膠電泳技術發展,而產生的一種DNA片段的檢測方法。此方法方便簡單快捷。采用適當的凝膠介質,在分子篩的作用下,到達分離核酸分子和檢測核酸分子的目的。一般使用溴酚藍和二甲苯晴作為指示劑。 一般實驗時,需要注意倒膠的溫度,膠的制作需要注意篩子拔出的方向,緩沖液不能太多。 服務內容:1 DNA片段的檢測。          2 DNA片段的純化。          3 實驗數據的分析和統計。
          產品名稱: 引物設計與合成
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          提供各種引物設計服務用途:定量PCR, SNP檢測,基因檢測,表達分析,DHPLC,恒溫擴增,基因檢測,感染等服務特點:1. 提供引物設計的參考序列,設計原理和分析報告,讓您對您的引物或探針的性能和特點有一個的了解,便于您對實驗結果的認識和分析。2. 可提供擴增前的與處理及擴增后服務:包括,核酸提取,pcr,核酸純化,序列分析,數據統計等服務。3. 一次的服務,全程的保障。目前,基爾頓生物,主營實驗技術服務,如想了解引物設計與合成的更多內容,歡迎來電咨詢。
          產品名稱: 甲基化檢測
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          一、服務介紹DNA甲基化是表觀遺傳學的重要組成部分,在DNA甲基化轉移酶(DNMTs)的作用下使CpG二核苷酸5’-端的胞嘧啶轉變為5’-甲基胞嘧啶。這種DNA修飾方在不改變基因序列前提下實現對基因表達的調控??蛇x擇的方法有亞硫酸氫鹽修飾后測序法(BSP),亞硫酸鹽修飾后的限制性內切酶(COBRA),甲基化特異性的PCR法(MS-PCR)。二、客戶提供血液、組織或DNA樣本待測片段序列或基因信息(名稱、種屬、序列或GeneBank Accession Number)三、交付內容實驗報告:詳細實驗步驟、克隆統計結果、PCR電泳照片、測序結果四、服務列表項目說明周期亞硫酸氫鹽修飾后測序法(BSP)方案設計、亞硫酸鹽處理、PCR、克隆測序、數據處理40個工作日亞硫酸鹽修飾后的限制性內切酶(COBRA)方案設計、亞硫酸鹽處理、PCR、酶切、圖片分析30個工作日甲基化特異性的PCR法(MS-PCR)方案設計、亞硫酸鹽處理、PCR、克隆測序、數據處理(設計甲基化引物和非甲基化引物各一對)     30個工作日
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          一、服務介紹染色質免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation, ChIP)是用于研究體內DNA與蛋白質相互作用的方法。ChIP不僅可以檢測體內反式因子與DNA的動態作用,還可以用來研究組蛋白的各種共價修飾與基因表達的關系。 二、服務流程1、甲醛處理細胞2、加入目的蛋白抗體3、加入proteinA4、沉淀抗體-靶蛋白-DNA復合物5、解交聯6、PCR分析 三、客戶提供1、細胞。2、ChIP級別的抗體。3、如ChIP結束后進行檢測,input作為對照;如結束后進行q-PCR,則需要提供預測靶基因結合位點的具體序列或目標靶基因的名稱、種屬、序列或GeneBank Acession Number。 四、交付內容實驗報告:詳細步驟、seq后或q-PCR分析后的結果 五、服務列表項目 備注 周期 ChIP 含一個陽性基因和一個陰性基因檢測 20個工作日 Seq input作為對照 20個工作日 q-PCR 包括引物設計,三個重復,i...
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          一、服務介紹分子克隆是在分子水平上提供一種純化和擴增特定DNA片段的方法。常含有目的基因,用體外重組方法將它們插入克隆載體,形成重組克隆載體,通過轉化與轉導的方式,引入適合的寄主體內得到復制與擴增,然后再從篩選的寄主細胞內分離提純所需的克隆載體,可以得到插入DNA的許多拷貝,從而獲得目的基因的擴增。  二、實驗原理外源DNA與載體分子的連接就是DNA重組,這樣重新組合的DNA叫做重組體或重組子。重組的DNA分子是在DNA連接酶的作用下,有Mg2+、ATP存在的連接緩沖系統中,將分別經酶切的載體分子與外源DNA分子進行連接。DNA連接酶有兩種:T4噬菌體DNA連接酶和大腸桿菌DNA連接酶。兩種DNA連接酶都有將兩個帶有相同粘性末端的DNA分子連在一起的功能,而且T4噬菌體DNA連接酶還有—種大腸桿菌連接酶沒有的特性,即能使兩個平末端的雙鏈DNA分子連接起來。但這種連接的效率比粘性末端的連接效率低,一般可通過提高T4噬菌體DNA連接酶濃度或增加DNA濃度來提高平末端的連接效率。 T4噬菌體DNA連接酶催化DNA連接反應分為3步:,T4DNA連接酶與輔助因子AT...
          產品名稱: SNP檢測
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          一、服務介紹單核苷酸多態性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP),指由于單個核苷酸堿基的改變而導致的核酸序列的多態性。在不同個體的同一條染色體或同一位點的核苷酸序列中,絕大多數核苷酸序列一致而只有一個堿基不同的現象,即SNP,它包括單堿基的轉換,顛換、插入及缺失等形式。SNP 技術服務平臺包括:測序分型、飛行時間質譜(MALDI-TOF MS)分型、Taqman 探針分型、Multiplex SNaPshot分型等技術平臺。 二、客戶提供1 組織、細胞、血液等2 rs號或NCBI基因登錄號(詳細的SNP檢測位點) 三、交付內容實驗報告:詳細步驟、測序結果、基因分型結果統計等
          產品名稱: RNA-seq
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          RNA-seq,也叫轉錄組測序技術,就是把mRNA,smallRNA,and NONcoding RNA等等,其中一些用高通量測序技術把它們的序列測出來,以此來檢測它們的表達水平。 原理及過程:轉錄組是某個物種或者特定細胞類型產生的轉錄本的集合。轉錄組研究能夠從整體水平研究基因功能以及基因結構,揭示特定生物學過程以及疾病發生過程中的分子機理。 先將樣品提取總RNA,在這之后,除去rRNA(對于真核生物,用帶有Oligo(dT)的磁珠富集mRNA,對于原核生物,用試劑盒去除rRNA),向得到的mRNA中加入Fragmentation Buffer使其片斷成為短片段,再以片斷后的mRNA為模板,用六堿基隨機引物(random hexamers)合成cDNA鏈,并加入緩沖液、dNTPs、RNase H 和DNA polymerase I 合成cDNA第二鏈,經過QiaQuick PCR試劑盒純化并加 EB緩沖液洗脫經末端修復、加堿基A,加測序接頭,再經瓊脂糖凝膠電泳回收目的大小片段,并進行PCR擴增,從而完成整個文庫制備工作,構建好的文庫用Illumina HiSeq20...
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          一、服務介紹microRNA對靶基因的功能研究是轉錄調控研究的一個重要的方向。利用熒光素酶報告基因法驗證microRNA對靶點作用性是一項常用的實驗技術。二、服務流程1、microRNA靶點預測2、獲得microRNA靶點序列3、靶序列克隆4、陽性克隆鑒定5、轉染6、熒光酶素檢測三、客戶提供靶基因和microRNA的名稱、種屬、序列或GeneBank Accession Number四、交付內容1、雙熒光素酶報告基因野生型載體、突變型載體;2、實驗報告:詳細步驟、載體圖譜、載體測序文件、雙熒光素酶檢測;五、服務列表 項目周期miRNA、靶基因預測2個工作日靶基因3’UTR雙熒光素酶野生型載體()10個工作日靶基因3’UTR雙熒光素酶突變型載體(一個作用位點)10個工作日miRNA表達載體或mimic與雙熒光素酶載體共轉染20個工作日雙熒光素酶檢測5個工作日共計47個工作日
          產品名稱: LncRNA芯片
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          LncRNA芯片Long non-coding RNAs(lncRNAs)是一類轉錄本長度超過200 nt的功能性非編碼RNA分子。目前的研究已證實,lncRNA參與X染色體沉默,基因組印記以及染色質修飾,轉錄激活,轉錄干擾,核內運輸等多種重要調控過程。隨著對lncRNA在哺乳動物進化及人類疾病發生發展中作用的日益關注,lncRNA調控機制已成為當前遺傳學研究的熱點問題。 篩選出差異表達的lncRNA是研究其在人類疾病發生中所扮演角色的基礎。富衡生物為用戶提供高通量的lncRNA芯片進行lncRNA表達譜分析,該芯片基于Agilent的SurePrint技術生產,實驗穩定可靠。 技術優勢信息覆蓋廣泛:覆蓋了多個權威lncRNA數據庫發布的數據;提供人,小鼠,大鼠的lncRNA檢測。lncRNA和mRNA同時檢測:芯片上包含有的lncRNA和新的mRNA序列檢測探針。一次芯片實驗可同時對lncRNA和mRNA進行分析。平臺成熟可靠:采用Agilent原位噴墨合成技術,了高檢測靈敏度和特異性。數據分析:提供lncRNA和mRNA表達譜差異分析和功能分析,以及二者的關聯分...
          產品名稱: microRNA芯片
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          microRNA芯片:RNA干擾(RNA Interference, RNAi)現象是一種進化上保守的抵御轉基因或外來病毒侵犯的防御機制。將含有靶基因mRNA同源互補序列的RNA(Double strand RNA, dsRNA)導入細胞后,能夠特異地識別該mRNA,引起mRNA的降解,從而導致相應的功能缺失。RNAi提供了一種經濟、快捷、高效的抑制特異基因表達的技術手段,該技術已被廣泛用于研究基因功能和傳染性疾病及惡性腫瘤基因治療領域。目前常用的RNA干擾手段為miRNA、 shRNA和siRNA等。MiRNA是一類可以通過RNAi機制調節基因表達的內源性小RNA,人工miRNA與shRNA的設計原理基本相同,由于miRNA具有內源性,因此其更易產生有效的基因沉默。 技術流程:dsRNA或pre-miRNA被導入細胞后,能夠被一種特異的核酸內切酶(Dicer)識別并切割成為小片段,這些片段在RNA解旋酶的作用下解鏈。繼之反義鏈在與體內一些酶(包括內切酶、外切酶、解旋酶等)結合形成RNA誘導的沉默復合物(RNA-Induced Silencing Complex,RISC),...
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          一、實驗介紹Luminex xMAP(multi-analyte profiling)技術,又稱流式熒光技術、液態芯片。該技術以抗體為基礎,以熒光編碼微球為核心,整合了激光檢測、應用流體學、高速數字信號和計算機運算法則等多項技術,實現了多因子的高通量檢測。目前, Luminex xMAP技術已被廣泛應用于臨床診斷、生物制藥、生物醫學研究等領域,成為醫學診斷技術和疾病機制研究等的重要發展方向。 二、實驗原理把直徑為5.6 μm的驟苯乙烯小球(或6.5μm的磁珠)用熒光染色的方法進行編碼,通過調節熒光染料的不同配比獲得多達500種不同特征熒光譜的微球,將每種編碼微球共價交聯上針對特定檢測物的抗原、抗體或核酸探針等捕獲分子。微球混合后加入微量待檢樣本,懸液中的靶分子與微球表面交聯的捕獲分子特異性結合,在一個反應孔肉同時完成多達500種不同的檢測反應。后用Luminex 200或FLEXMAP 3D進行檢測,儀器通過兩束激光分別對兩只另微球的編碼和檢測微球上報告分子的熒光強度,從而實現對目的因子的定量分析。 三、樣本要求1、單個樣品的體積≥100ul,如果同一樣本需檢測多個...
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