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          基爾頓生物科技 JRDUN BIOTECHNOLOGY
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          Products 蛋白相關實驗
          產品名稱: Western blot
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          免疫印跡(immunblotting)又稱蛋白質印跡(western blot),他是根據抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。western blot是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發展起來的一種新的免疫生化技術。由于免疫印跡(western blot)具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性,現在已成為蛋白分選的一種常規技術。免疫印跡(western blot)常用于鑒定某種蛋白,并能對蛋白進行定性和半定量分選。 western blot一般步驟:蛋白質抽提,蛋白質定量,變性聚丙稀酰胺不連續凝膠電泳(SDS-PAGE),蛋白質轉移,western blot膜的封閉和抗體孵育,western blot結果檢測,western blot數據分析,提供實驗報告。 western blot服務內容:專業的隊伍,提供完整的實驗步驟和結果,提供專業的數據分析,提供電子版掃膜結果,以及灰度值分析。目前,基爾頓生物主要實驗技術服務,如果您對我們的產品感興趣或有疑問,你可以通過網頁咨詢我們在線客服,或致電18017844061,我們將熱情為...
          產品名稱: ELISA
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          一、服務介紹ELISA以免疫學反應為基礎,使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。加入酶反應的底物后,底物被酶催化變為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據顏色反應的深淺刊物定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高,故可地地放大反應效果,從而使測定方法達到很高的敏感度。二 、服務流程1、包被抗體2、加樣3、加酶標抗體4、顯色三 、客戶提供細胞上清或血清、血漿、尿液等。ELISA檢測試劑盒(可代購)四、交付內容實驗報告:詳細步驟、吸光度值等 五、服務列表   項目周期ELISA10個工作日
          產品名稱: SILAC
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          背景簡介:SILAC( Stable Isotope Labeling with Amino acids in Cell culture)技術是依據細胞生長對必需氨基酸的依賴原理,利用穩定同位素標記( 13C,15N,2H)的必需氨基酸對細胞蛋白質組進行代謝標記的方法;13C,15N,2H是穩定同位素,沒有放射性,因此可以在常規條件下進行試驗。Arg(R)、Lys(K)、Leu(L)是SILAC常用的氨基酸。將(13C,15N,2H)等穩定同位素標記的R、K、L加入細胞培養基中,在細胞進行蛋白質合成時,這些穩定同位素標記的氨基酸自然被“摻入”到蛋白質中。通過6代的細胞增殖,整個細胞的蛋白質組會被穩定同位素氨基酸”標記SILAC“標記”了蛋白質與“未標記”的蛋白質(普通培養基培養)存在數目的質量差異,該質量差異在后續LC-MS的質譜( MSl)中呈現一對同位素質譜峰,通過質譜峰的信號強度能實現對2組樣品中每一個蛋白質表達水平的相對定量,終能確定蛋白質表達水平差異(差異蛋白質組學分析)和區分特異性和非特異性相互作用(蛋白質相互作用分析);同時通過二級質譜( MS/MS,MS2)實現對樣品中...
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          一、服務介紹蛋白質、多肽等生物分子的高效液相分析,包含蛋白質/多肽的純度鑒定,蛋白質/多肽的定量分析,天然/合成樣品的純度檢測,蛋白質/多肽的指紋圖譜分析,單糖/寡糖/多糖定性定量分析,混合物/粗提物分子量分布分析,代謝組分/小分子指紋圖譜分析和蛋白/多肽/糖類的少量純化制備二、客戶提供1、樣品含量:50-100 Pmol (液體約200 uL)2、樣品形式:液體;干粉3、樣品來源,檢測指標,樣本數量,樣本信息三、交付內容實驗報告,包括實驗流程、儀器方法、原始數據及圖片等。周期:4周
          產品名稱: TMT
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          簡單介紹:iTRAQ和TMT的技術原理一樣,所不同的是二者的分子結構有差異。與SILAC相比(標記蛋白質),iTRAQ和TMT是對肽段進行標記的。依據iTRAQ/TMT標簽的質量數差異,通過MS實現對多組樣品中的蛋白質進行相對定量:SILAC是通過MS( MSl)對蛋白質進行定量,而iTRAQ/TMT是通過二級MS( MS/MS.MS2)進行定量的。 iTRAQ/TMT能兼容來源的蛋白質樣品,并且能同時分析多達8-10組的樣品,分析通量高。 1、分別提取蛋白質并定量;2、Trypsin分別對蛋白進行酶解,提取肽段;3、用不同質量數的iTRAQ/TMT標簽分別對肽段樣品進行標記:4、標記完成后,混合樣品,用SCX進行組分分離(15-20組分);5、對每個組分進行LC-MS分析:6、蛋白質鑒定與定量分析,篩選差異表達的蛋白;7、生物學實驗驗證(Western blot,EUSA等): 技術優勢1、高通量,能同時進行多達8-10組樣品蛋白質組的定性與定量分析; 2、兼容來源的樣品(動植物組織、細菌、血液等); 3、實驗周期短。
          產品名稱: Label free
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          Label free: 非標定量蛋白質組學技術;比如你有10個組織樣品,分別提取蛋白質并酶解成肽段。然后每一個肽段樣品進行LC-MS分析,這樣就得到10個MS數據;對于1條肽段,其在10個樣品中的豐度(量)與其在MS1中的峰面積或信號強度成正比;理論上,對于10個樣品中的同一條肽段,其在LC上的保留時間(retention time, RT)是一致的,因此,可以通過對比MS圖譜,實現對蛋白質在不同樣本中的相對表達水平的定量分析。 Label free技術特色:1、與SILAC, iTRAQ/TMT技術相比,樣品無需標記,能終程度地保留樣品的“真實性”;2、樣品處理步驟簡單,蛋白質只需酶解即可進行LC-MS分析;3、能很大程度的節省樣本制備費用。 Label free分析軟件Maxquant,Progenesis 等
          產品名稱: iTRAQ
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          背景簡介:iTRAQ和TMT的技術原理一樣,所不同的是二者的分子結構有差異。與SILAC相比(標記蛋白質),iTRAQ和TMT是對肽段進行標記的。依據iTRAQ/TMT標簽的質量數差異,通過MS實現對多組樣品中的蛋白質進行相對定量:SILAC是通過MS( MSl)對蛋白質進行定量,而iTRAQ/TMT是通過二級MS( MS/MS.MS2)進行定量的;iTRAQ/TMT能兼容來源的蛋白質樣品,并且能同時分析多達8-10組的樣品,分析通量高。  試驗流程1、分別提取蛋白質并定量;2、Trypsin分別對蛋白進行酶解,提取肽段;3、用不同質量數的iTRAQ/TMT標簽分別對肽段樣品進行標記:4、標記完成后,混合樣品,用SCX進行組分分離(15-20組分);5、對每個組分進行LC-MS分析:6、蛋白質鑒定與定量分析,篩選差異表達的蛋白;7、生物學實驗驗證(Western blot,EUSA等): 目前,基爾頓生物主營實驗技術服務,歡迎廣大科研愛好者前來咨詢!
          產品名稱: EMSA實驗
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          EMSA:凝膠遷移或電泳遷移率檢測是一種檢測蛋白質和DNA序列相結合的技術,初用于研究DNA結合蛋白和其相關的DNA結合序列相互作用,可用于定性和定量分析。分為2種類型:同位素標記探針,非同位素標記探針。 通常將純化的蛋白和細胞粗提液和32P同位素標記的DNA或RNA探針一同保溫,在非變性的聚丙烯凝膠電泳上,分離復合物和非結合的探針。DNA-復合物或RNA-復合物比非結合的探針移動得慢。同位素標記的探針依研究的結合蛋白的不同,可是雙鏈或者是單鏈。當檢測如轉錄調控因子一類的DNA結合蛋白,可用純化蛋白,部分純化蛋白,或核細胞抽提液。在檢測RNA結合蛋白時,依據目的RNA結合蛋白的位置,可用純化或部分純化的蛋白,也可用核或胞質細胞抽提液。競爭實驗中采用含蛋白結合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段(特異),和其它非相關的片段(非特異),來確定DNA或RNA結合蛋白的特異性。在競爭的特異和非特異片段的存在下,依據復合物的特點和強度來確定特異結合。 實驗步驟:探針的標記,探針的純化,EMSA膠的配制,EMSA的結合反應,探針冷競爭反應,突變探針冷競爭,super-shif...
          產品名稱: 2D-DIGE
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          DIGE —雙向熒光差異凝膠電泳(Two-dimensional fluorescence difference gel electrophoresis,2D-DIGE),是在傳統雙向電泳的基礎上發展而來的新型蛋白質組學定量技術,其分離蛋白質混合的原理與雙向電泳是一致的,主要利用蛋白質的等電點和分子量的差異來分離蛋白質混合物,同時應用熒光染料的靈敏度及內標的使用等技術,使其在定量蛋白質組學的研究中效果明顯優于傳統雙向電泳。 DIGE使用的熒光染料有Cy2, Cy3和Cy5,它們能與蛋白質的賴氨酸側鏈氨基反應而使蛋白質被標記,被標記蛋白質的等電點和分子量不受影響,等量混合標記好的蛋白質后進行雙向電泳,不同凝膠之間可以通過cy2內標匹配,消除凝膠之間的差異,蛋白質表達量的變化則通過cy3和cy5不同熒光的強度來體現。 二、與常規雙向電泳后,銀染或考染膠相比,DIGE具有以下優勢:  1、靈敏度高,低可檢測到125pg的蛋白質; 2、高效性,同一塊凝膠上可以電泳兩個樣品,減輕了工作量; 3、線性范圍更廣,動態范圍高達10-5; 4、...
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