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          基爾頓生物科技 JRDUN BIOTECHNOLOGY
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          產品名稱:

          iTRAQ

          上市日期:2017-03-29

          背景簡介:iTRAQ和TMT的技術原理一樣,所不同的是二者的分子結構有差異。與SILAC相比(標記蛋白質),iTRAQ和TMT是對肽段進行標記的。依據iTRAQ/TMT標簽的質量數差異,通過MS實現對多組樣品中的蛋白質進行相對定量:

          SILAC是通過MS( MSl)對蛋白質進行定量,而iTRAQ/TMT是通過二級MS( MS/MS.MS2)進行定量的;

          iTRAQ/TMT能兼容來源的蛋白質樣品,并且能同時分析多達8-10組的樣品,分析通量高。

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          ?試驗流程

          1、分別提取蛋白質并定量;

          2、Trypsin分別對蛋白進行酶解,提取肽段;

          3、用不同質量數的iTRAQ/TMT標簽分別對肽段樣品進行標記:

          4、標記完成后,混合樣品,用SCX進行組分分離(15-20組分);

          5、對每個組分進行LC-MS分析:

          6、蛋白質鑒定與定量分析,篩選差異表達的蛋白;

          7、生物學實驗驗證(Western blot,EUSA等):

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