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          基爾頓生物科技 JRDUN BIOTECHNOLOGY
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          Products 細胞實驗
          產品名稱: SNP檢測
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          一、服務介紹單核苷酸多態性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP),指由于單個核苷酸堿基的改變而導致的核酸序列的多態性。在不同個體的同一條染色體或同一位點的核苷酸序列中,絕大多數核苷酸序列一致而只有一個堿基不同的現象,即SNP,它包括單堿基的轉換,顛換、插入及缺失等形式。SNP 技術服務平臺包括:測序分型、飛行時間質譜(MALDI-TOF MS)分型、Taqman 探針分型、Multiplex SNaPshot分型等技術平臺。 二、客戶提供1 組織、細胞、血液等2 rs號或NCBI基因登錄號(詳細的SNP檢測位點) 三、交付內容實驗報告:詳細步驟、測序結果、基因分型結果統計等
          產品名稱: RNA-seq
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          RNA-seq,也叫轉錄組測序技術,就是把mRNA,smallRNA,and NONcoding RNA等等,其中一些用高通量測序技術把它們的序列測出來,以此來檢測它們的表達水平。 原理及過程:轉錄組是某個物種或者特定細胞類型產生的轉錄本的集合。轉錄組研究能夠從整體水平研究基因功能以及基因結構,揭示特定生物學過程以及疾病發生過程中的分子機理。 先將樣品提取總RNA,在這之后,除去rRNA(對于真核生物,用帶有Oligo(dT)的磁珠富集mRNA,對于原核生物,用試劑盒去除rRNA),向得到的mRNA中加入Fragmentation Buffer使其片斷成為短片段,再以片斷后的mRNA為模板,用六堿基隨機引物(random hexamers)合成cDNA鏈,并加入緩沖液、dNTPs、RNase H 和DNA polymerase I 合成cDNA第二鏈,經過QiaQuick PCR試劑盒純化并加 EB緩沖液洗脫經末端修復、加堿基A,加測序接頭,再經瓊脂糖凝膠電泳回收目的大小片段,并進行PCR擴增,從而完成整個文庫制備工作,構建好的文庫用Illumina HiSeq20...
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          一、服務介紹microRNA對靶基因的功能研究是轉錄調控研究的一個重要的方向。利用熒光素酶報告基因法驗證microRNA對靶點作用性是一項常用的實驗技術。二、服務流程1、microRNA靶點預測2、獲得microRNA靶點序列3、靶序列克隆4、陽性克隆鑒定5、轉染6、熒光酶素檢測三、客戶提供靶基因和microRNA的名稱、種屬、序列或GeneBank Accession Number四、交付內容1、雙熒光素酶報告基因野生型載體、突變型載體;2、實驗報告:詳細步驟、載體圖譜、載體測序文件、雙熒光素酶檢測;五、服務列表 項目周期miRNA、靶基因預測2個工作日靶基因3’UTR雙熒光素酶野生型載體()10個工作日靶基因3’UTR雙熒光素酶突變型載體(一個作用位點)10個工作日miRNA表達載體或mimic與雙熒光素酶載體共轉染20個工作日雙熒光素酶檢測5個工作日共計47個工作日
          產品名稱: LncRNA芯片
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          LncRNA芯片Long non-coding RNAs(lncRNAs)是一類轉錄本長度超過200 nt的功能性非編碼RNA分子。目前的研究已證實,lncRNA參與X染色體沉默,基因組印記以及染色質修飾,轉錄激活,轉錄干擾,核內運輸等多種重要調控過程。隨著對lncRNA在哺乳動物進化及人類疾病發生發展中作用的日益關注,lncRNA調控機制已成為當前遺傳學研究的熱點問題。 篩選出差異表達的lncRNA是研究其在人類疾病發生中所扮演角色的基礎。富衡生物為用戶提供高通量的lncRNA芯片進行lncRNA表達譜分析,該芯片基于Agilent的SurePrint技術生產,實驗穩定可靠。 技術優勢信息覆蓋廣泛:覆蓋了多個權威lncRNA數據庫發布的數據;提供人,小鼠,大鼠的lncRNA檢測。lncRNA和mRNA同時檢測:芯片上包含有的lncRNA和新的mRNA序列檢測探針。一次芯片實驗可同時對lncRNA和mRNA進行分析。平臺成熟可靠:采用Agilent原位噴墨合成技術,了高檢測靈敏度和特異性。數據分析:提供lncRNA和mRNA表達譜差異分析和功能分析,以及二者的關聯分...
          產品名稱: Timm染色
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          一、服務介紹Timm染色方法是一種能夠顯示組織細胞內重金屬分布的常用方法。苔蘚纖維末端是腦內含鋅量高的區域,因此可以用此方法顯示苔蘚纖維末梢分布的情況。 二、實驗原理Timm法是對離子狀態、 疏松結合或螯合狀態下的鋅離子染色,便于光、電鏡的觀察。 三、實驗流程:1.切片貼附于多聚賴氨酸處理過的載玻片上,-20°保存。2.做的時候拿出來晾干,約10分鐘。3.把Timm顯影劑倒入修復盒中,放在在26℃的水浴箱或恒溫搖床里染色90-150 min,染色應該在避光的條件下進行。4.染色后,切片用蒸餾水沖洗幾遍,可以尼式染色復染,也可不復染。5.晾干,中性樹脂封膠片。 四、客戶提供樣本 五、公司提供圖片,結果及分析實驗周期:3-4周
          產品名稱: Masson染色
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          一、服務介紹Masson染色用于膠原纖維和肌纖維的染色及鑒定;染色結果:膠原纖維呈藍色、肌纖維呈紅色、細胞核呈藍黑色。 二、實驗原理1.膠原纖維是人體中的結締組織的主要成分,分布在全身的各個部位,組成膠原纖維的主要成分是膠原蛋白。新鮮時呈白色,故一般稱為白色纖維。在HE染色中被染為淡紅色。它的性質是具有韌性及緊固性,因此它能夠抵抗的牽拉力而不至于撕裂或拉斷它們常聚集成粗細不等的束,呈波浪狀。膠原纖維由許多根纖細的膠原纖維組成。在電鏡下膠原原纖維又由更細的原纖維構成。根據Kramen和Little所進行的電鏡研究證實,膠原纖維是特有的,具有橫紋的(重復期為650)原纖維。當有病變時這些纖維可發生變形,常出現的就是膠原纖維的壞死,膠原纖維在稀酸里可發生膨脹,變成膠樣物。它們能被酸性染料染成深淺不一的粉紅色,這些往往跟淀粉樣物難以區別。由于它們的屈光率較弱,因而在光學顯微鏡下,很難與纖維區別。膠原纖維的分子長度約為3000,直徑約為14,分子量為300000。 2.膠原纖維的組成:1) 細胞內合成前膠原蛋白分子,成纖維細胞攝取合成蛋白質所需的氨基酸,包括脯氨酸、賴氨酸和甘...
          產品名稱: 原位雜交
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          原位雜交(in situ hybridization)將標記的核酸探針與細胞或組織中的核酸進行雜交,稱為原位雜交。用原位雜交技術,可在原位研究細胞合成某種多肽或蛋白質的基因表達。此方法有很高的敏感性和特異性,可進一步從分子水平來探討細胞的功能表達及其調節機制。已成為當今細胞生物學、分子生物學研究的重要手段。 原位雜交實驗步驟:前期胚胎的制備。原位雜交開始的一天進行重新水化和固定、預雜交、雜交。原位雜交次日進行 1 將探針回收,放于-20C保存(通常探針可重復使用十次左右)2加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升,60℃,放置30分鐘,重復一次。3置換2XSSCT1ml,60℃,放置15分鐘。4置換0.2XSSCT1ml,60℃,放置30分鐘,重復一次。5用MABT洗兩次,每次五分鐘,放在搖床輕輕搖動。6室溫下加1ml 1:2:7溶液,時間為一小時。 7 按1:3000的比例在1:2:7溶液中加入酶連地高辛抗體,4C 冰箱過夜。原位雜交第三天進行1) 用1ml含10%熱滅活血清的MABT溶液置換抗體溶液,放置搖床上25分鐘,然后用1mlMABT置換,25分鐘,再用1mlMAB...
          產品名稱: 透射電鏡檢測
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          一、服務介紹透射電子顯微鏡(Transmission Electron Microscope,TEM)是使用頗為廣泛的一類電鏡。通過發射電子束從而穿過超薄的樣品,同時與樣本相互作用,既而形成圖像。透射電鏡具有分辨率高和放大倍數高的優點。其分辨率為0.1~0.2nm,放大倍數為幾萬到幾十萬倍。目前透射電鏡已經廣泛的應用到癌癥研究,病毒學研究,微生物學,細胞學研究等生物領域。 二、實驗原理透射電鏡是以電子束透過樣品經過聚焦與放大后所產生的物像,投射到熒光屏上或照相底片上進行觀察。電子與樣品中的原子碰撞而改變方向,從而產生立體角散射。散射角的大小與樣品的密度、厚度相關,因此可以形成明暗不同的影像。由于電子易散射或被物體吸收,故穿透力低,制備超薄切片(通常為50~100 nm)。要在機體死亡后的數分鐘內取材,組織塊要小(1mm3以內),常用戊二醛和鋨酸雙重固定,包埋介質包埋,用超薄切片機切成薄片,再經醋酸鈾和檸檬酸鉛等進行電子染色。 三、實驗流程1.取材2.固定3.脫水4.包埋5.固化6.超薄切片機切片(50-60 nm)7.3%醋酸鈾-枸櫞酸鉛雙染色8.透射電鏡觀察,拍片...
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          服務介紹1)技術原理:石蠟切片(paraffin section)是組織學常規制片技術中為廣泛應用的方法。石蠟切片不僅用于觀察正常細胞組織的形態結構,也是病理學和法醫學等學科用以研究、觀察及判斷細胞組織的形態變化的主要方法,而且也已相當廣泛地用于其他許多學科領域的研究中?;畹募毎蚪M織多為無色透明,各種組織間和細胞內各種結構之間均缺乏反差,在一般光鏡下不易清楚區別出;組織離開機體后很快就會死亡和產生組織腐敗,失去原有正常結構,因此,組織要經固定、石蠟包埋、切片及染色等步驟以免細胞組織死亡,而能清晰辨認其形態結構。冰凍切片是指將組織在冷凍狀態下直接用切片機切片。它實際上是以水為包埋劑,將組織進行冰凍至堅硬后切片的。在冰凍切片前組織不經過化學藥品處理或加熱過程,大大縮短了制片時間。同時,由于此法不需要經過脫水、透明和浸蠟等步驟,因而較適合于脂肪、神經組織和一些組織化學的制片,并作為快速切片的方法應用在臨床診斷 2)特點:石蠟切片標本可以長期保存使用,為性顯微玻片標本。冰凍切片制作過程較石蠟切片快捷、簡便,而多應用于手術中的快速病理診斷.組織變化不大,能很好保存脂肪,類脂等成分。能...
          產品名稱: 掃描電鏡
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          一、服務介紹 掃描電鏡是1965年發明的較現代的細胞生物學研究工具,它具有制樣簡單、放大倍數可調范圍寬、圖像的分辨率高、景深大等特點。近年來,掃描電鏡已廣泛地應用在生物學、醫學、等學科的領域中。 二、實驗原理 主要是通過發射電子聚焦光束來掃描樣品的表面形態.電子束與樣品表面的樣子發生作用,產生多種能夠被檢測的信號,這些信號就包含了樣品的表面形態和組成.染色。 三、實驗流程1. 樣品的初步處理a.取材樣品面積可達8mm×8mm,厚度可達5mm。對于易卷曲的樣品如血管、胃腸道粘膜等,可固定在濾紙或卡片紙上,以充分暴露待觀察的組織表面。b.樣品的清洗(1)用等滲的生理鹽水或緩沖液清洗;(2)用5%的蘇打水清洗;(3)用超聲震蕩或酶消化的方法進行處理。c. 固定固定所用的試劑和透射電鏡樣品制備相同,常用戊二醛及鋨酸雙固定。由于樣品體積較大,固定時間應適當延長。也可用快速冷凍固定。d. 脫水樣品經漂洗后用逐級增高濃度的酒精或丙酮脫水,然后進入中間液,一般用醋酸異戊酯作中間液。2. 樣品的干燥a.空氣干燥法空氣干燥法又稱自然干燥法,就是將經過脫水的...
          產品名稱: 尼氏染色
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          一、服務介紹尼氏(Nissl)染色液(Nissl Staining Solution)是神經生物學家廣泛使用的一種Nissl染色液,用于石蠟或冰凍切片神經元細胞漿中的尼氏小體(Nissl body)染色。Nissl染色是以德國的精神病學家和神經病理學家Franz Nissl的名字命名的。 二、實驗原理Nissl染色液染色后呈藍紫色,常用于顯示腦或脊髓的基本神經結構。Nissl小體大而數量多,說明神經細胞合成蛋白質的功能較強;相反在神經細胞受到損傷時,Nissl小體的數量會減少甚至消失。Nissl染色液染色的有效成分是堿性染料焦油紫(Cresyl violet),又名甲酚紫和克紫,它可以和RNA或DNA結合,可以染色粗面型內質網上的核糖體,也可以染色細胞核。染色后使細胞體呈現斑駁的(mottled)藍紫色染色。也可以用thionine (硫荲);tolridine blue (甲苯胺藍)等堿性染料。 三、實驗流程:1.樣本處理2.尼氏染色:染色3-10分鐘,蒸餾水洗滌2次(每次數秒鐘即可),95%乙醇約5s3.脫水、透明、封片 四、客戶提供樣本 五...
          產品名稱: 激光共聚焦
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          共聚焦顯微鏡(Confocal laser scanning microscope,CLSM)是近代先進的細胞生物醫學分析儀器之一。 激光掃描共聚焦顯微鏡(Laser scanning confocal microscope)是20世紀80年代中期發展起來并得到廣泛應用的新技術 ,它是激光、電子攝像和計算機圖像處理等現代高科技手段滲透,并與傳統的光學顯微鏡結合產生的先進的細胞分子生物學分析儀器,在生物及醫學等領域的應用越來越廣泛,已經成為生物醫學實驗研究的必備工具 。 共聚焦顯微鏡用激光作為光源,采用共軛聚焦原理和裝置,并利用計算機對所觀察的對象進行數字圖像處理觀察、分析和輸出。 其特點是可以對樣品進行斷層掃描和成像,進行無損傷觀察和分析細胞的三維空間結構. 主要應用:在細胞及分子生物學基礎研究中的應用,在腫瘤和抗癌藥物篩選研究中的應用,在血液病學和醫學免疫學研究中的應用,在大腦和神經科學中的應用,在眼科研究中的應用,在骨科研究領域中的應用。 服務內容:激光掃描共聚焦顯微鏡檢測,激光透射共聚焦顯微鏡檢測。組織和細胞中的定量熒光測定,細胞間通訊的研...
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